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二氧化碳细胞培养箱使用注意事项以及实验方案

   微处理控制系统是维持培养箱内温度、湿度和CO2 浓度稳态的操作系统。微处理控制系统和其它各种功能附件(如高低温自动调节和警报装置、CO2警报装置、密码保护设置等)的运用,使得二氧化碳细胞培养箱的操作和控制都非常的简便。
  二氧化碳细胞培养箱使用注意事项
  1、二氧化碳细胞培养箱未注水前不能打开电源开关,否则会损坏加热元件。
  2、培养箱运行数月后,水箱内的水因挥发可能减少,当低水位指示灯(WLow12)亮时应补充加水。先打开溢水管,用漏斗接橡胶管从注水孔补充加水使低水位指示灯熄灭,再计量补充加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后堵塞溢水孔。
  3、二氧化碳培养箱可以做高精度恒温培养箱使用,这时须关闭CO2控制系统。
  4、因为CO2传感器是在饱和湿度下校正的,因此加湿盘必须时刻装有灭菌水。
  5、当显示温度超过置定温度1℃时,超温报警指示灯(OverTemp7)亮,并发出尖锐报警声,这时应关闭电源30分钟;若再打开电源(温控)开关(Power20)仍然超温,则应关闭电源并报维修人员。
  6、钢瓶压力低于0.2MPa时应更换钢瓶。
  7、尽量减少打开玻璃门的时间。
  8、如果二氧化碳培养箱长时间不用,关闭前必须清除工作室内水分,打开玻璃门通风24小时后再关闭。
  9、清洁二氧化碳培养箱工作室时,不要碰撞传感器和搅拌电机风轮等部件。
  10、拆装工作室内支架护罩,必须使用随机专用扳手,不得过度用力。
  11、搬运培养箱前必须排除箱体内的水。排水时,将橡胶管紧套在出水孔上,使管口低于仪器,轻轻吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
  12、搬运二氧化碳培养箱前应拿出工作室内的搁板和加湿盘,防止碰撞损坏玻璃门。
  13、搬运培养箱时不能倒置,同时一定不要抬箱门,以免门受损。
  二氧化碳细胞培养箱下列步骤以单管冻存细胞进行培养的实验方案为例。
  1、准备一烧杯37°C的水。
  2、从液氮储存中取出一管细胞,注意保护手和眼睛。
  3、拧松管盖1/4圈,等待10秒钟以释放螺纹中可能残留的液氮,再重新拧紧管盖。
  4、将冻存管的下半部分置于37°C水浴中进行解冻,直至冻存管内仅剩余一小块冰芯,使细胞迅速解冻。
  5、用消毒液擦拭管体外表面,再将其移至II级A型层流细胞培养通风橱中。
  6、打开管盖,使用1 mL移液器上下吹打细胞悬液以分散细胞。
  7、从管中吸取20 uL细胞悬液,并将其稀释于20 uL台盼蓝溶液中。
  8、使用血细胞计数板来确定每毫升悬液中的活细胞数。
  9、将管中悬液(1 mL)稀释至产品说明中的推荐浓度。
  10、将5 mL细胞悬液加入25 cm2培养瓶,或将15 mL细胞悬浮液加入75cm2培养瓶中。
  11、摇匀培养瓶中的培养基以彻底分散细胞。许多类型的细胞都会迅速贴壁,如果没有在传代后即刻摇匀细胞,细胞可能生长不均匀。
  12、在37°C、5% CO2/95%空气、湿度细胞培养箱中培养细胞。二氧化碳细胞培养箱为了获得zui佳结果,培养开始后至少在24小时之内不要扰动细胞。
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